Về khuẩn lạc và phương pháp đếm khuẩn lạc (about colonies and colony counting method)

Về khuẩn lạc và phương pháp đếm khuẩn lạc (About colonies and colony counting method)

Khái niệm

Khuẩn lạc là kiểu cụm hoặc quần thể vi khuẩn có thể nhìn thấy bằng mắt thường, sinh khối của vi khuẩn đó khi chúng phát triển trên bề mặt của chất nền cứng. Khi các khuẩn lạc phát triển từ một tế bào gốc, bộ gen của chúng giống hệt nhau và được gọi là dòng vô tính.

Nói một cách đơn giản, khi chúng ta nuôi cấy một số loại vi khuẩn trong môi trường thuận lợi, chúng sẽ sinh trưởng và phát triển thành một “tập đoàn” vi khuẩn có thể nhìn thấy được và đó là một "khuẩn lạc".

Chúng tôi phân loại khuẩn lạc: theo môi trường, màu sắc và hình dạng...

Đơn vị tính

• CFU: CFU (viết tắt từ chữ Colony form units) là đơn vị hình thành khuẩn lạc, được dùng để ước tính số lượng vi khuẩn hoặc tế bào nấm trong 1 mẫu thử nghiệm nhất định. Khi kiểm tra vi sinh vật trong một mẫu thử nghiệm bằng cách đếm khuẩn lạc có trên đĩa petri hoặc đĩa môi trường chuẩn bị sẵn (ví dụ đĩa Compact Dry), đơn vị thường là CFU/mL, CFU/g, CFU/25g.
  • Đơn vị CFU/g, CFU/25g thường dùng cho mẫu thử nghiệm dạng rắn (thực phẩm, nguyên liệu thực phẩm…)
  • Đơn vị CFU/mL dùng cho mẫu thử nghiệm ở dạng dung dịch như mẫu nước nuôi trồng thủy sản, nước trái cây…
• MPN: MPN (viết tắt của Most Probable Number), thường được dùng để biểu thị số lượng vi khuẩn có trong một thể tích nhất định của mẫu chất lỏng.
• Sự khác biệt giữa CFU và MPN
  • CFU là đơn vị hình thành khuẩn lạc có trong 1 mẫu thử nghiệm nhất định. CFU thường được tính từ phương pháp đổ đĩa hoặc cấy trang trong khi đó MPN thường được tính toán bằng phương pháp lên men.
  • Đối với CFU, vi khuẩn phát triển trên môi trường đặc (ví dụ như thạch). Sau đó, các khuẩn lạc được đếm thủ công bằng mắt hoặc ứng dụng hiện đại.
  • Trong khi đó với phép đo MPN, các mẫu được nuôi cấy trong môi trường lỏng, (ví dụ như lên men). Kết quả không dùng phương thức đếm mà là so sánh với bảng xác xuất.

• MPN và CFU tương đương nhau. Cả hai đều được công nhận bởi nhiều tổ chức quản lý và khoa học trên thế giới, trong đó có cả Cơ quan Bảo vệ Môi trường Hoa Kỳ (EPA) và Tổ chức Tiêu chuẩn hóa Quốc tế (ISO). 

Các phương pháp đếm khuẩn lạc

• Pha loãng mẫu, cấy và ủ: Nếu bạn chỉ tạo một vệt mẫu vi sinh đơn giản trên đĩa thạch, sẽ có rất nhiều khuẩn lạc riêng rẽ mọc chồng lấn lên nhau khiến không thể đếm được số lượng khuẩn lạc. Để giải quyết vấn đề này, trộn mẫu với dung dịch, lấy một lượng nhỏ hỗn dịch mẫu ban đầu này để tiếp tục pha loãng nó. Lặp lại quy trình này 6 tới 10 lần. Chải đều dung dịch pha loãng cuối cùng lên đĩa thạch và ủ nó từ bốn tới bảy ngày trước khi đếm khuẩn lạc phát triển trên đó.
• Phương pháp đếm khuẩn lạc thủ công: Quy trình đếm khuẩn lạc là đếm từng điểm khuẩn lạc một lần. Một cách tiếp cận là sắp xếp các đĩa Petri trong một ô lưới và đếm các khuẩn lạc trong mỗi ô. Cũng nên đánh dấu các khuẩn lạc đếm được ở mặt sau của đĩa Petri. Nói chung, nên đếm ít nhất 3 đĩa. Chỉ khi sử dụng đĩa có 30-300 khuẩn lạc mới đưa ra kết luận đáng tin cậy. Các đĩa có quá nhiều hoặc quá ít khuẩn lạc đều không phù hợp và cần được pha loãng và cấy lại. 
• Phương pháp đếm khuẩn lạc tự động: Đếm khuẩn lạc thủ công mất rất nhiều thời gian và có thể nhầm lẫn do lỗi chủ quan của người thực hiện. Để cải thiện điều này có thể sử dụng các thiết bị đếm khuẩn lạc tự động. Máy đếm khuẩn lạc sẽ chụp một ảnh của đĩa, tách các khuẩn lạc khỏi nền và sau đó sử dụng một thuật toán để đếm các khuẩn lạc trên đĩa. Thuật toán có thể gặp có khăn trong việc phân biệt các khuẩn lạc khi hai hoặc nhiều khuẩn lạc chồng lấn ở vùng rìa, bởi vậy đây là một lĩnh vực của sự phát triển phần mềm hiện tại.

Các sản phẩm máy đếm khuẩn lạc đang được An Hòa Co phân phối chính hãng tại Việt Nam:

Máy đếm khuẩn lạc Colony Star, Model: Colony Star 8500, Hãng: Funker Gerber/Đức

Máy đếm khuẩn lạc tự động và đo vòng vô khuẩn, Model: IUL SphereFlash, Hãng: IUL/Tây Ban Nha

Đại diện nhập khẩu và phân phối hãng Funker Gerber/Đức và IUL/Tây Ban Nha tại Việt Nam

Công Ty TNHH Đầu Tư Phát Triển Thương Mại An Hòa

Hotline: Mr.Mạnh Hà - 0981.967.066

Email: sales2.anhoaco@gmail.com

Hân hạnh được phục vụ quý khách hàng trong những dự án sắp tới!